His标签蛋白纯化的挑战

His标签是为重组蛋白纯化而专门设计的一种标签，通常由6到10个组氨酸残基构成。由于其较小的分子量，His标签对目标蛋白的性质影响较小，因而成为当前最为普遍使用的标签。在His标签蛋白的纯化过程中，标签与金属离子之间的结合强度是关键因素。这一过程会受到多种因素的影响，例如Ni的配位情况、标签的长度、标签位置（C端或N端）、标签的暴露程度以及缓冲液的pH值等。在实际的纯化过程中，常常会遇到标签蛋白与柱的结合力较弱，导致大量流失，这不仅使得目标蛋白纯度降低，还可能导致最终的收率显著下降，甚至出现目标蛋白完全不结合的情况。

新型镍亲和纯化介质——VDXNTANiultra

为了解决以上存在的问题，推出了新型的镍亲和纯化介质VDXNTANiultra。该介质在与传统Ni-NTA的比较中表现出了更优越的性能。

应用案例

材料与方法

在相同条件下，我们使用传统的Ni-NTA和VDXNTANiultra对同一标签蛋白进行了纯化。

实验结果

实验结果显示，在相同的上样条件下，传统Ni-NTA在结合和洗杂过程中均出现了大规模的目标蛋白损失，从而显著降低了回收率。而VDXNTANiultra对此蛋白的结合力更强，结合和洗杂过程中蛋白损失显著减少，回收率也远高于传统的Ni-NTA。

层析条件

使用的层析柱包括VDXNTANiultra与传统的Ni-NTA，均为5mL容量和10cm柱高。样品来源于大肠杆菌的裂解液。平衡液为50mM PB，300mM NaCl，pH 8.0；洗脱液为50mM PB，300mM NaCl，500mM咪唑，pH 8.0；流速设置为1mL/min。

总的来说，使用尊龙凯时的VDXNTANiultra可以显著提升His标签蛋白的纯化效率，是生物医疗领域研究人员的理想选择。